Was ist real time quantitative pcr?

Real-time quantitative PCR (qPCR) ist eine Methode, mit der die Anzahl der DNA- oder RNA-Kopien in einer Probe quantitativ bestimmt werden kann. Diese Technik ermöglicht die maximale Empfindlichkeit und Präzision bei der Quantifizierung von Nukleinsäuren in Echtzeit.

Bei der qPCR wird die Amplifikation der Ziel-DNA oder -RNA während der Reaktion überwacht. Dies geschieht durch die Einbindung eines Fluoreszenzdyes, der während der Reaktion mit steigender Amplifikation der Nukleinsäuren anfängt zu fluoreszieren. Die Akkumulation des Fluoreszenzsignals wird in Echtzeit durch spezielle Detektionssysteme gemessen.

Diese Methode ermöglicht eine schnelle und zuverlässige Quantifizierung von Ziel-Nukleinsäuren und kann sowohl für die absolute Quantifizierung (Bestimmung der absoluten Anzahl der Zielmoleküle) als auch für die relative Quantifizierung (Vergleich der Abundanz der Zielmoleküle zwischen verschiedenen Proben) verwendet werden. qPCR bietet eine hohe Genauigkeit, hohe Ansprechgeschwindigkeit, breiten dynamischen Bereich und große Reproduzierbarkeit.

Die Anwendungen von qPCR sind vielfältig und reichen von der Genexpression, Pathogendiagnostik, Virusdetektion, Mutationstypisierung, RNA-Interferenz, klinischen Forschung, Lebensmittelüberwachung bis hin zur Umweltüberwachung. Dank ihrer Sensitivität und Effizienz ist die qPCR zu einer der wichtigsten Methoden in den Bereichen der molekularen Biologie und der medizinischen Diagnostik geworden.